產(chǎn)品編號 | D-9107 |
英文名稱 | JC-10 |
中文名稱 | 線粒體膜電位熒光探針JC-10 |
別 名 | Enhanced JC-1 JC-1的卓越代替品; |
CAS | 5563-28-0 |
保存條件 | Store at -20℃, protect from light. |
產(chǎn)品介紹 |
JC-10 is a derivative of JC-1 useful for determining mitochondrial membrane potential by flow cytometry, fluorescence microscopy and in microplate-based fluorescent assays. JC-10 accumulates in mitochondria, selectively generating an orange J-aggregate emission profile (590 nm) in healthy cells. However, upon cell injury, as membrane potential decreases, JC-10 monomers are generated, resulting in a shift to green emission (525 nm). The principal advantages of JC-10 relative to JC-1 include improved solubility in aqueous media and an ability to detect subtler changes in mitochondrial membrane potential loss. JC-10 allows for both qualitative visualization, considering the shift from orange to green fluorescence emission, and quantitative detection, considering the fluorescence intensity ratio, of mitochondrial membrane potential changes. Wavelength Maxima: Excitation 510nm, Emission 525nm JC-10產(chǎn)品描述: 線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-10 )是一種以JC-10 為熒光探針,快速靈敏地檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒,可以用于早期的細胞凋亡檢測。 JC-10 是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm 的理想熒光探針??梢詸z測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時,JC-10 聚集在線粒體的基質(zhì)中,形成聚合物,可以產(chǎn)生紅色熒光;在線粒體膜電位較低時,JC-10 不能聚集在線粒體的基質(zhì)中,此時 JC-10 為單體,可以產(chǎn)生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉(zhuǎn)變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。 線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。通過 JC-10 從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降,同時也可以用JC-10 從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。 JC-10 單體的最大激發(fā)波長為 515nm ,最大發(fā)射波長為529nm ;JC-10 聚合物的最大激發(fā)波長為585nm ,最大發(fā)射波長為590nm 。實際觀察時,使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設(shè)置即可。 JC-10性質(zhì): 1. 分子量:~600Da 2. 純度:≥95% (HPLC) 3. 儲存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。 4. 染色過程: (1) 用DMSO將JC-10溶解,制得3mM的JC-10溶液(2mg/mL)。 注:建議分裝,任何未使用的小瓶應(yīng)儲存在<-20℃。避免反復(fù)凍融循環(huán),并避光. (2) 準備1X JC-10工作溶液:在實驗當(dāng)天,解凍一份JC-10 stockolution到室溫。用Hanks和20 mM Hepesbuffer(HHBS)或您選擇的緩沖液(pH 7-8)稀釋制備10-30μM 1X工作溶液。通過votexing將它們混合均勻。 (3) 準備測試用細胞模型(例如細胞凋亡模型),離心細胞,每管取1-5×10^5個細胞。 (4) 將細胞重懸于500μLJC-10工作溶液中。 (5) 在室溫或37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中孵育10至30分鐘,避光。注意:適當(dāng)?shù)姆跤龝r間取決于所使用的單個細胞類型和細胞濃度。可嘗試優(yōu)化每個實驗的孵育時間。 (6) 使用熒光顯微鏡(使用FITC和TRITC通道)或流式細胞儀(使用FL1和FL2通道)監(jiān)測Ex / Em = 490/525 nm和540/590 nm處的熒光變化。 注意事項: 為了您的安全和健康,請注意適當(dāng)防護。 JC-10 探針裝載完并洗滌后盡量在 30 分鐘內(nèi)完成后續(xù)檢測。 |
1、抗體溶解方法 | |
2、抗體修復(fù)方式 | |
3、常用試劑的配制 | |
4、免疫組化操作步驟 | |
5、免疫組化問題解答 | |
6、Western Blotting 操作步驟 | |
7、Western Blotting 問題解答 | |
8、關(guān)于肽鏈的設(shè)計 | |
9、多肽的溶解與保存 | |
10、酶標抗體效價測定程序 | |