產(chǎn)品編號(hào) | D-9114 |
英文名稱 | Calcein, AM |
中文名稱 | 鈣黃綠素乙酰甲酯 |
別 名 | Cellstain Calcein-AM; 3',6'-Di(O-acetyl)-4',5'-bis[N,N-bis(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein, tetraacetoxymethyl ester; 細(xì)胞染色劑黃綠素-AM; 3'-O-乙酰胺-2',7'-二(羧乙基)-4或5-羧基熒光素,二乙酰甲酯; |
CAS | 148504-34-1 |
保存條件 | Store at -20℃, protect from light. |
產(chǎn)品介紹 |
Calcein, AM CAS#:148504-34-1 中文名:3'-O-乙酰胺-2',7'-二(羧乙基)-4或5-羧基熒光素,二乙酰甲酯 英文名:3',6'-Di(O-acetyl)-4',5'-bis[N,N-bis(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein, tetraacetoxymethyl ester 別名:鈣黃綠素乙酰甲酯 分子式:C46H46N2O23 分子量:994.86 性質(zhì): 1. 外觀:白色或淺黃色晶體 2. 純度:≥90%(HPLC) 3. 產(chǎn)品描述: Calcein, AM是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑,它穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Calcein,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi),發(fā)出強(qiáng)綠色熒光。與其它同類試劑(如BCECF, AM和CFDA)相比,Calcein, AM的細(xì)胞毒性很低。Calcein的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為490 nm和515 nm。 Calcein, AM僅對(duì)活細(xì)胞染色。作為核染色染料的PI不能穿過活細(xì)胞的細(xì)胞膜,它穿過死細(xì)胞膜的無序區(qū)域而到達(dá)細(xì)胞核,并嵌入細(xì)胞的DNA雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光(激發(fā):535 nm,發(fā)射:617 nm),因此PI僅對(duì)死細(xì)胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發(fā),因此可用熒光顯微鏡同時(shí)觀察活細(xì)胞和死細(xì)胞。用545 nm激發(fā),僅可觀察到死細(xì)胞。根據(jù)以上特點(diǎn),Calcein, AM和PI經(jīng)常被結(jié)合用來作為活細(xì)胞和死細(xì)胞的雙重染色。 由于不同細(xì)胞系的最佳染色條件不同,我們建議個(gè)別確定Calcein, AM和PI的合適濃度。 4. 使用方法 (1)用DMSO制備1 mM 的Calcein, AM溶液,并用PBS將其稀釋制成1~50 μM的Calcein, AM溶液。注:如果Calcein, AM很難進(jìn)入細(xì)胞,可以使用表面活性劑,如Pluronic F127。 (2)將1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積的Calcein, AM溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中。注:也可以用1/10濃度的Calcein, AM溶液代替培養(yǎng)基。 (3)在37℃培養(yǎng)細(xì)胞15~30分鐘。 (4)用PBS或適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌細(xì)胞兩次。 (5)用490 nm激發(fā)波長(zhǎng),515 nm發(fā)射波長(zhǎng)的濾光片的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。 儲(chǔ)存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。 |